冰冻切片普鲁士蓝染色实验报告

发布时间: 2026-08-18 14:29:21.620

普鲁士蓝染色实验报告

一、实验器材及试剂

1、实验器材

名称

厂家

型号

脱水机

武汉俊杰电子有限公司 

JJ-12J

包埋机

武汉俊杰电子有限公司

JB-P5

病理切片机

上海徕卡仪器有限公司

RM2016

冻台

武汉俊杰电子有限公司

JB-L5

组织摊片机

武汉俊杰电子有限公司

KD-P

烤箱

天津市莱玻瑞仪器设备有限公司

GFL-230

载玻片

南通美韦德生命科学有限公司

PC2-301

正置光学显微镜

日本尼康

Nikon Eclipse ci

成像系统

日本尼康

Nikon DS-U3

2、主要实验试剂

试剂名称

厂家

货号

无水乙醇

国药集团化学试剂有限公司

100092683

二甲苯

国药集团化学试剂有限公司

10023418

普鲁士蓝染液套装

武汉百仟度生物科技有限公司

C2140

中性树胶

武汉百仟度生物科技有限公司

C1009

OCT包埋剂

武汉百仟度生物科技有限公司

C2200

二、实验步骤:

1、冰冻切片预处理:取出-20℃冷冻保存的组织冰冻切片(切片厚度8~10μm),置于室温复温10~15min,充分晾干切片表面水汽,避免组织脱落。无需脱蜡处理,用蒸馏水轻柔冲洗切片2~3min,去除切片表面残留的OCT包埋剂、冰晶及杂质,保持组织面洁净完整。

2、组织固定:将预处理完成的脑组织切片完全浸入4%多聚甲醛固定液中,室温条件下固定15~20min,稳固脑组织细胞与组织结构,避免后续漂洗、染色、脱水过程中组织破损、脱落。固定结束后,用蒸馏水充分冲洗切片3次,每次2min,彻底洗净残留固定液,避免残留试剂干扰染色反应。

3、普鲁士蓝染色:将亚铁氢化钾溶液和盐酸溶液等比例混合成普鲁士蓝染液,切片入染液中染色1h,蒸馏水洗2遍。

4、核固红染色:核固红染液染色1-5min,流水冲洗。

5、脱水封片:切片依次放入无水乙醇I 5min -无水乙醇II 5min-无水乙醇Ⅲ5min -二甲苯                        Ⅰ5min-二甲苯Ⅱ5min透明,中性树胶封片。

6、显微镜镜检,图像采集分析。

三、结果判读:

铁离子呈蓝色,细胞核红色。

四、注意事项:

1、普鲁士蓝染液要现配现用。

2、切片染色前用蒸馏水洗干净,防止自来水中的铁离子在染色中反应,造成假阳性。

 

 

 

 

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